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domingo, 24 de septiembre de 2017

Para qué adquirir una olla a presión para el laboratorio

10 de setiembre de 2015
Consulta a Cecilia, microbióloga

Yo 

¿Qué pasaría si no tengo olla a presión y simplemente lavo bien con hipoclorito los frascos o cajas de Petri? ¿Van a crecer no solo colonias del lugar donde recolecté sino también otras "contaminadas"? Lo pregunto para entender y poder defender la necesidad de contar con la olla.

Cecilia

No podés sustituir con hipoclorito la olla a presión. Eso se debe a que no podrías esterilizar los medios de cultivo de esta forma y ademas precisarías después del hipoclorito lavar con agua esterilizada.
Pensando en cómo justificar la necesidad de una olla a presión es muy fácil. Trabajar en microbiologia requiere de una serie de precauciones, que si bien no son tan difíciles, es necesario realizarlas. 

I

Lo primero de todo es la necesidad de trabajar con material estéril, esto se debe a que los microorganismos se encuentran en todos lados y si no los "eliminamos" de nuestro lugar de trabajo siempre trabajaremos con contaminaciones. Por dicho motivo se requiere de una olla a presión o mucho mejor de un autoclave. 

II

Es importante también cuando se manipulan medios de cultivo trabajar sobre una superficie limpia, cerca de un mechero o 2 si es posible, y tomando la precaución de tener las manos limpias; por ejemplo, podemos rociar etanol 70% aproximadamente sobre las mismas previo a trabajar. Si utilizamos un ansa es necesario quemarla en una llama y si queremos macerar algún tejido por ejemplo podemos usar barras de vidrio previamente embebidas en etanol 95% y quemadas en la llama y utilizar agua estéril o suero fisiológico (ambos se consiguen en farmacias). Con este pequeño listado te estoy dando las herramientas básicas para trabajar en un laboratorio. 

III

Otro tema no menor, es que una vez que inoculen/siembren en los medios de cultivo las muestras a estudiar, se deben cerrar las placas y que los estudiantes no las vuelvan a abrir. Las bacterias y hongos demoraran un par de días en aparecer siempre que dejemos los medios de cultivo a temperatura ambiente o si poseen una estufa pueden dejarlos a 30 ºC.

Después de la consulta

Hice un "recortaypega" con recetas que me pasó Cecilia, para empezar a hacer micro microbiología clásica en el laboratorio del liceo.   

Foto: Instituto de investigaciones biológicas "Clemente Estable"

domingo, 28 de septiembre de 2008

Célula 2008 (I)

¿Cómo están formados los seres vivos?
Para buscarle respuesta a esta pregunta, elegí 5 observaciones a realizar al microscopio: protozoarios ciliados, hoja de planta acuática elodea, epidermis de catáfila (capa) del bulbo de cebolla, raspado de mucosa bucal (cara interna de la mejilla) y bacterias de yogur. He aquí algunas de las muchas cosas que habría para compartir con ustedes.
1
Cultivo de protozoarios ciliados
Mayra, estudiante de profesorado en biología, nos trajo esta receta para “cultivar” protozoarios ciliados: poner en un recipiente agua estancada + trozos de hojas de verduras “de hoja” (lechuga, acelga, berro, etc.) + perejil + cáscara de tomate + hojitas de romero + tierra de jardín…
No hay que tomársela al pie de la letra: es una base para ir probando, variando, investigando. Puede ser también hojas secas, pétalos de flores, pasto fresco, pasto seco, cáscara de banana seca, granos de pimienta, algas verdes de las que están adheridas a piedras en una cañada, etc., etc.
Ah! Dejar esa mezcla a reposar una semana en lo posible en lugar cálido (20-35 ºC) pero fuera del alcance del sol directo.
Encontrarán una capa espesa sobre el líquido. En un primer momento solo tenía en cuenta esta capa: sacaba un poco y ponía entre porta y cubre y… poca cosa… a veces sí.
Volví a hacer cultivo; esta vez los diversifiqué, o sea, preparé un poco en 5 vasos como para que funcionara en alguno, así hubiera más chance. Aproveché un "agüita con redonditas del agua" de la cañada del Parque Baroffio también para agregar al cultivo. Y, sin querer queriendo, probeta en mano tomé una muestra de la “tierrita del fondo” del recipiente: ¡EUREKA! He aquí 2 de ellos (miren el corte de pelo tan moderno que tienen):


2
El plan de trabajo fue: PRIMERO observar (un preparado y un microscopio por cada grupo pequeño de 4 o 5 estudiantes), guiada por el profesor que pasaba por todos los grupos revisando, buscándoles lo que tenían que ver, allanándoles el camino… pero dándoles la posibilidad primero de buscar ellos; SEGUNDO interpretar todos juntos en el pizarrón: pasa un estudiante a dibujar lo que vio, luego el profesor va guiando la discusión acerca de lo que vimos y de lo que debimos ver… y de lo que hay más allá de lo que pudimos ver. Y así se va completando el “esquema de interpretación” que complementa el dibujo-esquema que cada estudiante hizo al observar.
Para la interpretación de la observación de los microbios “protozoarios ciliados”, había 2 preguntas-guía fundamentales. UNA, ¿cómo llegaron al cultivo… o se crearon a partir de la descomposición de la materia vegetal del cultivo… o del agua podrida? ¿Se hicieron allí o ya venían con los materiales?
OTRA, ¿están formados por células? ¿Por una o por muchas?
3
Ismael
y Joshua son estudiantes del curso biología 1º. Nos enseñaron sus ideas acerca de las células: tienen volumen, tienen como una piel que es la membrana celular, tiene varias capas (y un núcleo) como nuestro planeta, tiene como un corazón que es el núcleo. Y en determinado momento de su vida, la célula se va haciendo más angosta en el medio hasta dividirse en 2… células “hijas”. Y así comienza un nuevo ciclo. Sin duda las células están VIVAS. Pero siempre vale la pena preguntarse: ¿qué significa decir que algo está vivo? Hasta buscar una respuesta bien precisa y bien científica.
4
Imaginemos que hacemos una visita a la célula, nos hacen un recorrido y nos van hablando de cada cosa por donde pasamos. Pero, por falta de tiempo no pasamos por el núcleo, solo lo vemos de lejos. Alguien pregunta: ¿qué guardan ahí? ¿Alimento? ¡Si es el núcleo, algo importante debe ser! ¿Se sabe?
¡Claro que se sabe!
5
Un estudiante preguntó ¿De qué están hechas las células? ¿De células?
Como esas muñecas rusas que una grande se abre y hay otra dentro, y esa se abre también y hay otra en su interior… y así sucesivamente. ¡PERO NO!
Las células están hechas de partes: núcleo, membranas y otras cosas. Para que la célula funcione, viva, deben estar todas las partes necesarias y en su lugar. El núcleo solo no vive, la membrana celular sola no vive. Pero todo junto forma un mecanismo, un sistema que sí funciona ¡y hasta se reproduce! ¿Qué tal?
6
¿Las células son como los átomos?
Las células son mucho más grandes. ¿Cuánto?
A ver: una célula podría medir 0,01 mm (1 centésima de milímetro). Y un átomo –creo- podría medir 0,0000001 mm. Entonces la célula sería cien mil veces más grande que un átomo.
Para medir la longitud de las células se usa la unidad “micrométro”. Mil micrómetros equivalen (uno al lado del otro) a un milímetro. Así que 0,01 mm equivalen a 10 micrómetros.
7
¿Cuánto puede pesar una célula?
La primera respuesta es ¡no pesa nada! ¿Cómo que no pesa nada? ¡Está hecha de materia!
Florencia es compañera de los 2 estudiantes antes mencionados e hizo una cartulina linda de ver, sin fuente. Ella me dijo: “yo sé que a usted no le gusta el recorta y pega”. Y allí aparecía una posible medida de la masa de una célula: 1 ng.
¿Qué es un ng? Un nanogramo, o sea, una milmillonésima de gramo. Pesa poco pero pesa.
8
Luego de ver un trozo de hoja de planta acuática al microscopio podemos decir que la vemos verde porque, dentro de las células hay un montón de “pelotitas verdes”. Que son verdes porque tienen una sustancia de color verde, la clorofila. Esas pelotitas se llaman los cloroplastos.
¿Otra cosa sobre estas “pelotitas”? Sí. De ellas sale el oxígeno que respiramos…
9
Las células de la hoja de la planta acuática elodea y de la “telita” epidermis de la cebolla se ven al microscopio como una pared de ladrillos. Cada ladrillo sería una célula.
Pero a no confundirse: estas células tienen una capa gruesa que las rodea que se llama pared celular. Es uno de los componentes de estas células, es el más externo.
Entonces pared celular no es una pared de células como ladrillos. Las células formando como una pared de ladrillos son un TEJIDO. En cambio, la pared celular es una parte de cada célula. ¿Ta?
10
Al finalizar la serie de observaciones-interpretaciones, las comparamos con una tabla como la que ven escaneada aquí a la derecha. Hazle click para verla mejor. Puedes imprimirla.
Al llegar a “citoesqueleto”, les dije a los estudiantes lo siguiente:
Las células también tienen esqueleto. Pero no de huesos como nosotros sino de varillas muy finitas y de tubos. Forman un armazón como el de una carpa. Por lo que yo sé las células que tienen citoesqueleto (de lasa que observamos) serían todas MENOS las del yogur (bacterias). Ojo: capaz que si buscamos conocimientos los más actuales posibles (en Internet por ejemplo), diga algo diferente…
Unos días después de decirles esto, estaba yo navegando por Internet en busca de fotos de células de bacterias vistas con microscopio electrónico y, medio de casualidad me topé con un titular que decía: "Cell biology: Bacteria's new bones".
“Bones” en ingles es huesos. Sabía que las bacterias no tienen huesos. Debía referirse al citoesqueleto. Y wikipedia me lo confirmó:
http://es.wikipedia.org/wiki/Citoesqueleto
Según Wikipedia está el citoesqueleto eucariota (el de las células de los protozoarios, de la elodea, de la cebolla, de nosotros) y el citoesqueleto procariota (el de las bacterias del yogur).
Contento con mi descubrimiento, les conté a los estudiantes y, donde habíamos puesto “NO” en la tabla, lo cambiamos por un “SÍ”. Ya el citoesqueleto no diferencia a las células, las hace más parecidas, más “parientas”.
Hablando con Alberto, el encargado del laboratorio, le decía: en un extremo está el profesor solitario que, a fuerza de voluntarismo ganas de superarse y estar al día, se abre paso y lo logra… En el otro extremo, está el profesor que espera que las “novedades” le lluevan del cielo, le lleguen en bandeja. Yo preferiría al profesor interactuando en red con sus colegas, donde todos aportan algo en la medida de sus posibilidades y juntos dudan y confirman y aprenden.


¿Quieres ayudarnos?
Colega: piensa en tus clases de "célula" como una línea de trabajo del laboratorio done tu trabajas. Comparte con nosotros tus hallazgos, tus dificultades, tus recetas, tus metáforas, tus fotos, todo lo que tengas ganas de compartir en este estimulante ida y vuelta en red.
Estudiante: ¿qué otros materiales y seres vivos te interesaría observar al microscopio para entender cómo está formado? ¿Qué otras preguntas te surgen? ¿Qué más sabes?
Comenten, critiquen y propongan sin miedo.

domingo, 13 de julio de 2008

Técnica de molde de epidermis vegetal con esmalte de uñas



Un martes de vacaciones de julio a las siete y media de la tarde-noche, aproximadamente. Mientras otros montevideanos estarían en el cine, yo estaba frente a un microscopio bastante imponente para lo que un profesor de biología está acostumbrado. Me saqué el gusto de mirar cromosomas de células de raíz de carqueja aumentados alrededor de mil veces.
Esto ocurrió al visitar a Pablo, un científico que tiene un laboratorio de genética en la Facultad de Agronomía; allí se encuentra este microscopio, que no es precisamente muy nuevo ni muy moderno, aunque hace poquito se le colocó una pieza que permite mirar las cosas a través de un monitor de computadora. Mejor dicho, lo que capta el microscopio va a un programa de computadora que es capaz de mostrar la imagen digitalizada y de trabajar sobre ella, concretamente guardar esas imágenes; o sea, sacar fotos de lo que se está viendo al microscopio.
Pues Pablo que, además de buen científico es buen anfitrión, o sea, alguien que trata bien a sus invitados.
Busco anfitrión en una enciclopedia: era un rey legendario de Tebas (ciudad de Grecia) que daba muy buenos banquetes a sus invitados. Les prometo una crónica de mi visita al laboratorio de Pablo que fue un verdadero banquete para un profesor de biología, aunque lo único de comer fueron las galletas dulces que yo llevé. Ahora les ofrezco uno de los “platos” de ese banquete: podría llamarle TÉCNICA DE MOLDE DE EPIDERMIS VEGETAL CON ESMALTE DE UÑAS.







Aquí va el "paso a paso":

1. Colecta hojas frescas de distintas plantas. Déjate ganar por la curiosidad de poder "bichar" la "piel" (perdón, la epidermis) de los árboles y hierbas que tienes a un brazo de distancia.
NOTA: seamos rigurosos: piel solo tienen los animales y más precisamente los vertebrados. La epidermis vegetral y animal solo tienen de similar el nombre. Pero bueno, en ambos casos coincide con el límite del organismo con su ambiente. Es algo "especial"...




2. Pinta con esmalte de uñas una pequeña superficie de cada hoja que colectaste. Es más que suficiente un área de 10x5 milímetros. Pablo usó esmalte transparente. Como puedes ver en las fotos al microscopio el contraste es bueno. Pero se podría PROBAR cómo queda con un esmalte coloreado...






3. Deja secar el esmalte unos minutos...

4.Trata de despegar una capa de esmalte de cada hojacon una pinza (si tienes de punta fina, mejor). No tiene que ser todo el esmalte; alcanza con una "tirita" de capa, digamos de 4 o 5 mm x 1 o 2. Si ya has hecho preparados de epidermis de catáfila (capa) de bulbo de cebolla, necesitas la misma cantidad de esta capa de esmalte para observar al microscopio.



5. Has el preparado: extiende la capita de esmalte lo menos arrugada posible EN SECO sobre un portaobjetos limpio (no seas chacho/a, con alcohol queda mejor). Ponle un cubreobjetos. Pero puedes PROBAR de ponerle 1 o 2 gotas de agua a ver si es igual o mejor...




6. Observa al microscopio y tómate tu tiempo hasta que sea un disfrute: piensa en la "arquitectura" que tienes ante ti, en la variedad de "puzzles" naturales; piensa también en la nobleza del esmalte que hizo una copia negativa y extraordinariamente FIEL y minuciosa de la superficie de la hoja: una notable huella.



7. Si quieres conservar el preparado, usas el propio esmalte de uñas como pegamento para pegar el "cubre" al "porta". Con marcador permanente escribes la especie de la planta en cuestión.
Esto es muy serio y muy didáctico, pero también muy lúdico. No le quites este carácter. Conéctense con el "niño interno".
¿Que no tienes esmalte de uñas en tu laboratorio? ¿¿¿Qué estás esperando para pedirlo en tu propia "lista de compra"???
¡A probar la receta, señoras y señores... y me cuentan! Y a variar y a mejorar y a investigar... ¡y a fotografiar! ¿Se acuerdan?



¡Enormes gracias al anfitrión Pablo!

domingo, 13 de abril de 2008

Cómo NO son las larvas del mosquito Aedes aegypti


Comentaba con Santiago, estudiante de biología 2º, que estaría muy bueno conseguir larvas de mosquito Aedes aegypti muertas y conservadas en un frasquito con alcohol, para poder verlas con una buena lupa, y luego guardarlas como material natural en el laboratorio para observarlas cuando se precise.
Santiago me dijo: “Yo le traigo para la próxima clase”.
A la clase siguiente me da un frasquito con líquido y unas cositas chiquitas, finitas y larguitas que estaban en ese líquido.
Después de la clase me fui al laboratorio a mirar ese líquido bajo lupa binocular. Y fue la oportunidad para aplicar una idea que, de tan fantástica y tan sencilla, no me decidía a practicar.
Marcela y Alejandro, que son arqueólogos, me dijeron que se pueden sacar fotos de algo que ves al microscopio simplemente acercando una cámara digital lo suficiente al ocular del microscopio como para que aparezca en la pantalla de la cámara y... ¡click! (aunque las digitales no hacen click).
Estas fotos que ven aquí se las saqué a las larvas que Santiago recogió en algún “agua” de algún recipiente de su patio. La lupa las aumento 20 veces, se escribe "20X".
A la clase siguiente le dije a Santiago: “no son larvas de Aedes aegypti... Creo que ni siquiera larvas de mosquito”. Pero han servido para ver cómo no son.
¿No estaría bueno comparar estas fotos con alguna que muestre una buena larva de A. aegypty?

¿Quieren ayudar?
¿Qué hace un arqueólogo?
¿Dónde se estudia para ser arqueólogo?
¿Podrían conseguir una foto de una larva de A. aegypti? Pueden enviarla a
ciencia20@gmail.com
¿Alguien podría reconocer estas larvas, decirnos de que tipo de animales son?